1.一體化小室——細胞培養&顯微成像兩用玻片/培養皿
細胞免疫熒光實(shí)驗您是怎么做的？
還在用小玻片，先泡酸、再晾干、再coating、再種細胞、染色、最后封片成像？
那您太out了吧！
使用德國ibidi產(chǎn)品，先養細胞、然后直接固定、染色、成像，在培養皿/玻片上全部搞定！不僅能幫您把細胞養好、還能幫您省時(shí)省力的獲得漂亮的成像結果（見(jiàn)圖1）！
圖1. 傳統爬片方法（左）與ibidi 產(chǎn)品免疫熒光實(shí)驗（右）的比較
2.ibidi產(chǎn)品底部媲美蓋玻片厚度，為高分辨率顯微成像而設計的光學(xué)特性
德國ibidi公司研發(fā)的μ-Slide與μ-Dish系列產(chǎn)品，與一般市面上常見(jiàn)的細胞培養皿不同，其底部是由polymer塑料制成，具有與玻璃材質(zhì)媲美的高光學(xué)穿透與低背景熒光等特性。相較于一般細胞培養產(chǎn)品（圖2左），ibidi產(chǎn)品（圖2右）底部構造厚度符合標準蓋玻片厚度（180 μm），用高倍鏡物鏡觀(guān)察，可以使焦距集中在待測樣本上，產(chǎn)生良好的成像結果。
圖2. ibidi細胞培養產(chǎn)品底部媲美蓋玻片厚度
3.ibidi產(chǎn)品底部化學(xué)耐受性強，適用于多種常用的細胞固定劑（見(jiàn)圖3）
圖3.ibidi產(chǎn)品底部適用的溶劑列表
4. 多種多樣的細胞培養表面
細胞進(jìn)行生長(cháng)、發(fā)育和信號傳遞很大程度上取決于細胞容器的表面處理方式。
ibidi 產(chǎn)品底部相比于普通培養皿更加平滑（見(jiàn)圖4）。目前，ibidi產(chǎn)品μ-Slides和μ-Dishes有標準底、玻璃底以及多種底部預包被的產(chǎn)品，適用于培養不同的細胞類(lèi)型，不同底之間的比較（見(jiàn)圖5）。
ibidi標準底具有親水超薄的特性，該底部的光學(xué)特性符合多種成像技術(shù)的要求，如相差、共聚焦和雙光子顯微成像。
ibiTreat，作為ibidi的表面處理方式，通過(guò)了大量不同細胞系和原代細胞培養測試，且已發(fā)表的30000多篇使用了ibidi產(chǎn)品的期刊論文中，超過(guò)90%使用了ibiTreat，表明大多數細胞在ibiTreat下生長(cháng)良好，無(wú)需進(jìn)行額外的表面處理。ibiTreat是一種物理修飾的表面處理方式，讓耗材表面親水，利于絕大多數種類(lèi)的細胞貼壁，可與其他標準細胞培養瓶和培養皿相媲美。
圖4. AFM（原子力顯微技術(shù)）測量表面粗糙度。ibidi產(chǎn)品（右下）比普通培養皿具有更平滑的底部構造，更加的成像效果。
ibidi標準底也有疏水、無(wú)包被的表面可以選擇?？梢愿鶕唧w的實(shí)驗需求，進(jìn)行特定的包被，或者直接用來(lái)培養非貼壁細胞。
ibidi也有玻璃底的產(chǎn)品。玻璃底可以直接培養細胞，但可能需要進(jìn)行表面處理來(lái)促進(jìn)細胞更好的貼壁。ibidi研發(fā)的玻璃底產(chǎn)品尤其適用于TIRF、單光子及單分子應用。
圖5. ibidi標準底與ibidi玻璃底
基于以上特殊的底部構造，ibidi μ-Dish，μ-Slide以及μ-plate等產(chǎn)品都既適用于常規細胞培養，又可以簡(jiǎn)化免疫熒光實(shí)驗步驟、節約實(shí)驗時(shí)間，并且獲得顯微成像效果。
ibidi μ-Dishes產(chǎn)品可以進(jìn)行常規的細胞培養、轉染、免疫熒光實(shí)驗以及高分辨率顯微成像。目前ibidi μ-Dishes主要包括35mm（高壁和低壁）（見(jiàn)圖6）。35mm低壁的產(chǎn)品更適合于在顯微鏡下對細胞進(jìn)行操作，如進(jìn)行電生理膜片鉗記錄細胞，或者吸取單細胞進(jìn)行單細胞基因組測序等實(shí)驗。
圖6. ibidi μ-Dish系列產(chǎn)品：35mm高壁VS低壁
ibidi μ-Dishes另外一個(gè)精巧的設計是帶鎖的蓋子（見(jiàn)圖7）。當蓋子處于lock位置，減小蒸發(fā)的影響，因而可以在非濕潤環(huán)境中進(jìn)行長(cháng)時(shí)程的細胞實(shí)驗，如需要在培養箱外，顯微鏡下進(jìn)行長(cháng)時(shí)程的活細胞觀(guān)察實(shí)驗。由于Dish特殊的氣體通透特性，在細胞培養期間氣體交換（C02，O2）是并不受lock位置影響的。
圖7.帶鎖的培養皿設計
μ-Slides well系列產(chǎn)品：μ-Slides 2 well，4 well，8well
如果您希望同時(shí)獲得多個(gè)樣品的顯微成像結果，如比較同種細胞加入不同藥物刺激的形態(tài)變化，或者實(shí)驗初期用來(lái)篩選好用的抗體及摸索最佳抗體濃度等實(shí)驗，推薦使用μ-Slides well系列產(chǎn)品（見(jiàn)圖8）。不同大小的開(kāi)放小室適用于不同量的細胞培養。其底部也是ibidi標準底處理，滿(mǎn)足細胞培養、免疫熒光實(shí)驗、高分辨率顯微成像的需求。
圖8. μ-Slides well系列產(chǎn)品：μ-Slides 2 well，4 well，8well，18well
在此基礎上，如果需要進(jìn)行更佳的顯微鏡成像實(shí)驗，如進(jìn)行實(shí)時(shí)的活細胞不同位點(diǎn)的掃描，μ-Slides well ph+系列產(chǎn)品更適合您。在傳統的μ-Slides well的孔的中間，ph+產(chǎn)品加了一層特殊的平板（見(jiàn)圖9），這層平板可以有效避免開(kāi)放小室中影響相差成像效果的凹液面的形成。在這層平板與well的四周有縫隙，方便向其中加入細胞及換液等操作。
圖9. μ-Slides well 與 μ-Slides well ph+ 產(chǎn)品以及成像對比圖。左圖. 產(chǎn)品對比圖，ph+在中間有特殊的平板，四周有孔洞，方便鋪細胞及換液等操作。右圖. ph+有效防止凹液面形成（右側），整個(gè)視野都有良好的相差成像效果。
以上產(chǎn)品還有底部帶網(wǎng)格的（見(jiàn)圖10），如35 mm Dish Grid-500 & Grid-50，μ-Slides 8 well Grid-500?？蓱糜诩毎凹毎麍F的重定位，特定區域發(fā)生事件的數目如細胞轉染效率的統計，細胞運動(dòng)距離的參考，對單個(gè)細胞進(jìn)行顯微注射或者追蹤軸突的生長(cháng)等。同樣這些產(chǎn)品具備ibidi標準底設計，適用于高分辨率的顯微成像。
圖10. 帶網(wǎng)格產(chǎn)品的底部網(wǎng)格圖示
一體化小室產(chǎn)品還包括μ-Slide channel 系列產(chǎn)品（圖11A），這類(lèi)產(chǎn)品有通道式的細胞培養空間，同樣具有ibidi標準底，適合于高分辨率顯微成像。產(chǎn)品兩端有魯爾接頭，可應用于流體剪切力實(shí)驗，即在培養基流動(dòng)狀態(tài)下就行細胞培養。
在開(kāi)放小室中鋪細胞時(shí)，通常依賴(lài)于人為晃動(dòng)操作，對于新手尤其容易使細胞聚團，導致細胞分布不均（圖11C）。而通道式的設計，巧妙回避這一問(wèn)題，只需要向通道中加入細胞懸液，無(wú)需晃動(dòng)（圖11B），輕松使細胞在通道中均勻分布（圖11D）。另外當需要進(jìn)行精確的少量試劑換液時(shí)，或者試劑、抗體珍貴，μ-Slide channel 系列產(chǎn)品將是好的選擇。
圖11. μ-Slide channel 系列產(chǎn)品。A. μ-Slide I及μ-Slide IV產(chǎn)品圖示。B. μ-Slide I為例說(shuō)明系列產(chǎn)品適用步驟，向通道中加入100 ul細胞懸液，向一側儲液池中加入無(wú)細胞的培養液，向另一側儲液池中加入無(wú)細胞的培養液，置于培養箱中培養。C. 開(kāi)放小室的細胞分布，依賴(lài)于晃動(dòng)操作，經(jīng)常會(huì )分布不均勻。D. channel中細胞的分布，由于其集合設計，使細胞非常容易的均勻分布在通道中。
考慮到有些用戶(hù)希望保存標本，ibidi公司還開(kāi)發(fā)了removable的硅膠培養室（圖12左），用于細胞培養和顯微成像。將硅膠材料移除后，可以封片進(jìn)行保存。
另外，ibidi公司還開(kāi)發(fā)了Sticky的well及通道（圖12右）。這類(lèi)產(chǎn)品通用性強，可與多種多樣的底部材料粘貼。而且對于不易放入通道培養的細胞、組織等，可以選擇先放在底部材料上，再將培養通道粘貼到其上進(jìn)行實(shí)驗。
圖12. Removable & Sticky系列產(chǎn)品。圖左. 3/8/12 Well Chamber, removable；圖右. sticky-Slide 8 well、sticky-Slide I Luer、sticky-Slide VI 0.4。
易必迪ibidi公司專(zhuān)注于細胞培養及功能實(shí)驗的耗材及儀器開(kāi)發(fā)，產(chǎn)品設計巧妙，適用于各種各樣的實(shí)驗需求，簡(jiǎn)化實(shí)驗步驟，節約實(shí)驗時(shí)間。如果您也在培養細胞，也在做細胞免疫熒光實(shí)驗，也在做細胞功能實(shí)驗，那么快來(lái)試試ibidi系列產(chǎn)品吧，絕對讓您實(shí)驗變得輕松簡(jiǎn)單，事半功倍！
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